《植物生理学报》 2006, 42(5): 928-932

利用细胞松弛素 B 分离柑橘及金柑植物微核的研究

付春华 刘继红 邓秀新*

华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室，武汉 430070

通信作者：邓秀新；E-mail: xxdeng@mail.hzau.edu.cn；Tel: 027-87281712

摘　要：

采用细胞松弛素 B (CB)处理结合蔗糖梯度超速离心方法分离柑橘和金柑亚原生质体的结果表明，柑橘和金柑原生 质体的直径为 20~30 mm，采用蔗糖梯度超速离心分离亚原生质体，其适宜离心力是 1 400 000×g; 4',6- 二脒基 -2- 苯基吲 哚(DAPI) 的染色效果最好，细胞核和细胞质可明显区分；愈伤组织经 CB 处理 36 h 后再分离亚原生质体，可显著提高微 原生质体的产量，分离的微原生质体直径为 1.8~3.5 mm，产量达到 2~3×104 个 •g-1 (FW)。

关键词：柑橘；金柑；细胞松弛素 B；微核；蔗糖梯度超速离心

收稿：2006-05-16   修定：2006-05-16

资助：国家自然科学基金(30200189)。

利用细胞松弛素 B 分离柑橘及金柑植物微核的研究

付春华 刘继红 邓秀新*

华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室，武汉 430070

Corresponding author: ; E-mail: xxdeng@mail.hzau.edu.cn; Tel: 027-87281712

Abstract:

采用细胞松弛素 B (CB)处理结合蔗糖梯度超速离心方法分离柑橘和金柑亚原生质体的结果表明，柑橘和金柑原生 质体的直径为 20~30 mm，采用蔗糖梯度超速离心分离亚原生质体，其适宜离心力是 1 400 000×g; 4',6- 二脒基 -2- 苯基吲 哚(DAPI) 的染色效果最好，细胞核和细胞质可明显区分；愈伤组织经 CB 处理 36 h 后再分离亚原生质体，可显著提高微 原生质体的产量，分离的微原生质体直径为 1.8~3.5 mm，产量达到 2~3×104 个 •g-1 (FW)。

Key words: 柑橘；金柑；细胞松弛素 B；微核；蔗糖梯度超速离心